ICS 67.120.99 X 22 团 体 标 准 T/CAAA 018—2019 驼血多肽 Came blood polypeptide 2019-01-07 发布 2019-01-07 实施 中国畜牧业协会 发布 T/CAAA 018—2019 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由中国畜牧业协会提出并制定。 本标准负责起草单位：内蒙古东汇生物科技有限公司、中国科学院兰州化学物理研究所、内蒙 古骆驼研究院。 本标准主要起草人：邸多隆、裴栋、董学舟、那木尔、斯仁达来、郭富城、吉日木图。 T/CAAA 018—2019 驼血多肽 1 范围 本标准规定了驼血多肽的技术要求和检验方法。 本标准适用于驼血多肽的生产。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本 文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 2760 食品添加剂使用标准 GB 4789.1 食品微生物学检验 总则 GB 4789.2 食品微生物学检验 菌落总数测定 GB 4789.3 食品微生物学检验 大肠菌群计数 GB 5009.3 食品中水分的测定 GB 5009.4 食品中灰分的测定 GB 5009.5 食品中蛋白质的测定 GB/T 22492 大豆肽粉 GB 5009.11 食品中总砷及无机砷的测定 GB 5009.12 食品中铅的测定 GB 5009.123 食品中铬的测定 GB 5009.15 食品中镉的测定 GB 5009.17 食品中总汞及有机汞的测定 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 驼血多肽 came blood polypeptide 以检验检疫合格的骆驼血为原料，经酶解、离心、浓缩、干燥、包装等工序制成的多肽产品。 3.2 肽含量 the content o f Came blood 肽占试样的质量分数。 4 技术要求 4.1 原料要求 骆驼血来自非疫区，经宰前宰后检疫合格的健康骆驼，屠宰后经卫生采集无污染的新鲜骆驼血。 1T/CAAA 018—2019 4.2 感官要求 应符合表 1的要求。 表 1 感官要求 项目 要求 检验方法 色泽 淡黄色或乳白色，色泽均匀一致。 滋味和气味 具有本品特有的气味和滋味，无焦糊味和其它异味。 组织形态 粉末状，无结块现象。 杂质 无肉眼可见的外来杂质。 取适量试样置于白色瓷盘中，在自然光下 观察色泽和状态。闻其气味，用温开水漱 口，品其滋味 4.3 理化指标 应符合表 2的要求。 表 2 理化指标 项目 指标 检验方法 蛋白质(以干基计,N×5.79)/(g/100g) ≥ 80.0 GB 5009.5 肽含量（以干基计）/(g/100g) ≥ 80.0 GB/T 22492 相对分子量小于3000Da的多肽所占比例/% ≥ 80.0 附录A 水分(g/100g) ≥ 5.0 GB 5009.3 灰分(以干基计）/(g/100g) ≤ 8.0 GB 5009.4 4.4 污染物限量 污染物限量应符合表 3的要求。 表 3 污染物限量 项 目 指标 检验方法 铅（以Pd计）/（mg/kg） ≤ 1.0 GB 5009.12 镉（以Cd计）/（mg/kg） ≤ 0.1 GB 5009.15 总砷（以As计）/（mg/kg） ≤ 1.0 GB 5009.11 铬（以Cr计）/（mg/kg） ≤ 2.0 GB 5009.123 总汞（以Hg计）/（mg/kg） ≤ 0.1 GB/T 5009.17 4.5 微生物指标 应符合表 4的要求。 表 4 微生物限量 采样方案a及限量 项 目 n c m M 检验方法 菌落总数/(CFU/g) 5 2 104105GB 4789.2 大肠菌群/(CFU/g) 5 2 10 102GB 4789.3 注：a样品的采样及处理按GB 4789.1的规定执行。 2 T/CAAA 018—2019 4.6 食品添加剂 食品添加剂的使用应符合 GB 2760 的要求及相关公告的规定。 5 检测方法 驼血多肽所占比例的检测方法见规范性附录 A。 3T/CAAA 018—2019 附录 A （规范性附录） 相对分子质量小于 3000Da 的驼血多肽所占比例的检测方法 (高效体积排阻色谱法) A.1 方法提要 采用高效体积排阻色谱法测定。即以多孔性填料为固定相，依据样品组分分子体积大小的差别 进行分离，在肽键的紫外吸收波长 220nm条件下检测，使用相对分子质量分布测定的专用数据处理 软件（即 GPC软件） ，对标准品和样品的色谱图及其数据进行处理，根据相对分子质量校正曲线方 程，计算得到驼血多肽的相对分子质量大小及分布范围。 A.2 试剂 A.2.1 乙腈：色谱纯 A.2.2 三氟乙酸：分析纯 A.2.3 水： GB/T 6682 规定的一级水 A.2.4 相对分子质量校正曲线所用标准品： A.2.4.1 细胞色素 C（cytochrome C,MW12384 ） A.2.4.2 抑肽酶（aprotinin,MW6512 ） A.2.4.3 杆菌酶（bacitracin,MW1423 ） A.2.4.4 乙氨酸－乙氨酸－酪氨酸－精氨酸（MW451） A.2.4.5 乙氨酸－乙氨酸－乙氨酸（MW189） A.3 仪器和设备 A.3.1 高效液相色谱仪：配有紫外检测器和含有 GPC数据处理软件的色谱工作站 A.3.2 流动相真空抽滤脱气装置 A.3.3 超声波振荡器 A.3.4 分析天平：感量 0.0001g A.4 色谱条件与系统适应性实验 A.4.1 色谱柱：TSKgel G2000 SWXL 300mm ×7.8mm(GEL LOT 502R) 或性能与此相近的同类型其 他适用于测定肽的分子量分布的凝胶柱 A.4.2 流动相：乙腈：水：三氟乙酸，体积比为 40:60:0.05 A.4.3 检测波长： 220nm A.4.4 流速：0.5mL/min A.4.5 柱温：30℃ A.4.6 进样体积：10μL A.4.7 为使色谱系统符合检测要求，规定在上述色谱条件下，凝胶色谱柱的柱效即理论塔板数（N ） 4 T/CAAA 018—2019 按三肽标准品（乙氨酸－乙氨酸－乙氨酸）峰计算不低于 5000，蛋白肽的分配系数（Kd ）应在 0～ 1之间 A.5 相对分子质量校正曲线制作 分别用流动相配制成浓度为 1.0 g/L左右的上述不同相对分子质量的肽标准品溶液， 用孔径为 0.2 μm～0.5μm 聚四氟乙烯或尼龙过滤膜过滤后分别进样，得到系列标准品的色谱图。以相对分子质 量的对数（lgMW ）对保留时间作图或作线性回归得到相对分子质量校正曲线及其方程。 A.6 样品制备 用称量纸称取样品 125.0mg左右， 转移至 25mL容量瓶中， 用流动相定容至刻度， 超声振荡 10min， 使样品充分溶解混匀，用孔径为 0.2μm～0.5μm 聚四氟乙烯或尼龙过滤膜过滤，其滤液用于测定。 A.7 相对分子质量的计算 将A.6制备的样品溶液在 A.4色谱条件下进样分析，然后使用 GPC数据处理软件，根据相对分 子质量校正曲线方程对样品的色谱图及其数据进行计算处理，即可得到样品中驼血多肽的相对分子 质量大小及分布范围。用峰面积归一化法计算相对分子质量在 3000以下的驼血多肽相对百分比之 和。 __________________________ 5