ICS65.020.30 B43 团体标准 T/SDAA014－2021 禽舍内空气微生物采样规范 SpecificationforAirborneMicroorganismSamplinginPoultryFarms 2021－06－22发布 2021－07－23实施 山东省畜牧协会发布 全国团体标准信息平台 T/SDAA014-2021 全国团体标准信息平台 T/SDAA014-2021 前言 本标准按照GB/T1.1-2020给出的规则起草。 本标准由山东省畜牧协会提出并归口。 本文件起草单位：山东畜牧兽医职业学院、诸城外贸有限责任公司、黑龙江北三峡养殖有限公司。 本文件主要起草人：李舫、沈美艳、袁东芳、孙秋艳、杜燕、李丛丛、王福红、乔昌明、沈志勇。 本文件为首次发布。 全国团体标准信息平台 T/SDAA014-2021 全国团体标准信息平台 T/SDAA014-2021 禽舍内空气微生物采样规范 1范围 本文件规定了规模化禽舍空气中的需氧菌总数、真菌总数、霉菌总数检测时，样品采集前的准 备、采样点的设定、采样高度的设定、自然沉降法和撞击法。 本文件适用于规模化禽舍空气微生物的采集。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于 本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本文件。 GB-T18204.8公共场所拖鞋微生物检验方法霉菌和酵母菌测定 GB/T18204.3公共场所卫生检验方法第3部分：空气微生物 DB37/T1606畜禽养殖环境空气采样技术规范 3术语和定义 3.1 禽舍 禽所处的封闭或半封闭的生活区域。 3.2 采样点 采样的平板培养基或微生物采样器安放的位置。 3.3 采样高度 采样的平板培养基或微生物采样器放置的高度。 3.4 采样频率 单位时间内在同一采样点的采样次数。 全国团体标准信息平台 T/SDAA014-2021 3.5 自然沉降法 将开盖的平板培养基放置于空气中暴露一定时间，微生物因重力作用而自然沉降到培养基表面， 经过培养后统计菌落数来推算空气中的微生物数。 3.6 撞击法 采用撞击式空气微生物采样器，使空气通过狭缝或小孔产生高速气流，从而将悬浮在空气中的 微生物采集到培养基平板上，经实验室培养后得到菌落数的测定方法。 4采样前的准备 4.1按照GB/T18204.3-2013制备营养琼脂平板、鲜血琼脂平板、沙氏琼脂平板，按照GB-T18204.8 制备孟加拉红琼脂平板。 4.2检查六级筛孔撞击式微生物采样器的性能规格、采样流量，利用高压蒸汽灭菌法，121℃灭菌 20min。 4.3根据养殖模式和禽舍结构设定采样点、采样高度、采样时间和采样频率。 5采样点的设定 5.1设置5个采样点。按均匀布点原则，按梅花型设置5个采样点。 5.2禽舍内采样点与墙壁的距离不小于1.0m，与禽舍入口和出口的距离不小于2.0m。 5.3采样点应避开通风口、通风道等。 6采样高度 按照DB37/T1606-20103.2.1.2执行。 7自然沉降法 7.1采样时间 7.1.1将平板培养基开盖，静置5min。 7.1.2定时饲喂的禽舍尽可能在饲喂前进行采样。 7.2操作方法 7.2.1将平板培养基置于采样点，每种培养基在采样点使用3个，打开皿盖，静置5min。 7.2.2采样结束，将平板培养基加盖，做好记录。将营养琼脂平板和鲜血琼脂平板倒置于37℃的电 全国团体标准信息平台 T/SDAA014-2021 热恒温培养箱内，培养24h～48h；将沙氏琼脂平板和孟加拉红琼脂平板倒置于28℃的电热恒温培 养箱内，培养72h。 7.2.3采样期间，禁止人员任意走动。 7.3采样记录 采样相关数据的记录表参见附录A。 7.4采样频率 7.4.1禽舍空舍期按消毒程序前、后各采样1次。 7.4.2禽舍养殖期内根据带禽消毒的需要按时采样。 7.5计算 计数每平板上生长的菌落数，求出全部采样点的平均菌落数，以菌落形成单位 （colony-formingunits,CFU）表示，检测结果以CFU/皿给出。 8撞击法 8.1采样时间 8.1.1每个采样点采样时间根据舍内卫生状况，结合预采样结果控制在1min～5min。 8.1.2定时饲喂的禽舍尽可能在饲喂前进行采样。 8.2操作方法 8.2.1现场在采样点将平板去掉上盖，培养基朝上分别放置在六级筛孔撞击式微生物采样器的每一 级上，连接气泵，以28.3L/min泵流速进行采样，每级培养基上的菌落数一般在30CFU～300CFU 为宜。 8.2.2采样结束，将各级平皿取下，加盖，做好记录。将营养琼脂平板和鲜血琼脂平板倒置于37℃ 的电热恒温培养箱内，培养24h～48h；将沙氏琼脂平板和孟加拉红琼脂平板置于28℃的电热恒温 培养箱内，培养72h。 8.2.3采样期间，禁止人员任意走动。 8.3采样记录 见5.1.6。 8.4采样频率 见5.1.7。 全国团体标准信息平台 T/SDAA014-2021 8.5计算 计数每平板上生长的菌落数，然后计算六级平皿菌落总和，将结果与采气体积、采用时间换算 成CFU/m3，几个不同采样点求平均值。 空气某微生物数量=六级平皿菌落数总和/（采样时间*28.3）*1000 全国团体标准信息平台 T/SDAA014-2021 附录A （资料性附录） 禽舍空气微生物采样记录表 禽场名称： 禽场地址： 编号： 采样点布置图 采样点布置图内容 1.采样禽场平面图。 2.采样禽舍平面图。 3.采样禽舍内养殖数量。 4.采样禽舍养殖方式。 5.采样禽舍通风方式及通风设 备位置。 6.采样点的位置及编号。 7.采样舍内禽健康状况。 全国团体标准信息平台